Mae yna lawer o arwyr tawel o'n cwmpas, sy'n ymddangos yn gyffredin, ond mewn gwirionedd maen nhw'n cyfrannu llawer atom ni'n dawel. Proteinase K yw'r "arwr tawel" yn y diwydiant diagnosteg foleciwlaidd, er o'i gymharu â'r "mawr a phwerus" yn y diwydiant, mae proteinase K mor isel fel ein bod wedi anwybyddu ei bwysigrwydd ers tro byd. Gyda dechrau epidemig y goron newydd, mae'r galw am proteinase K wedi codi'n sydyn, ac mae'r cyflenwad gartref a thramor ymhell y tu ôl i'r defnydd, ac yn sydyn sylweddolodd pawb fod proteinase K mor bwysig.
Beth yw defnydd proteinase K?
Mae proteinase K yn broteas serin gyda gweithgaredd ensym proteolytig a gall gynnal gweithgaredd mewn ystod eang o amgylcheddau (pH (4-12.5), byffer halen uchel, tymheredd uchel o 70°C, ac ati). Yn ogystal, nid yw gweithgaredd proteinase K yn cael ei atal gan SDS, wrea, EDTA, hydroclorid guanidin, isothiocyanate guanidin, ac ati, a gall rhywfaint o lanedydd hefyd wella gweithgaredd proteinase K. Mewn triniaeth feddygol (diheintio firysau a microbau), bwyd (tyneru cig), lledr (meddalu gwallt), gwneud gwin (eglurhau alcohol), paratoi asid amino (plu wedi'i ddiraddio), echdynnu asid niwclëig, hybridio in situ, ac ati, mae cymwysiadau ar gyfer proteinase K. Y cymhwysiad a ddefnyddir amlaf yw echdynnu asid niwclëig.
Gall proteinase K ensymoli pob math o broteinau yn y sampl, gan gynnwys yr histonau hynny sydd wedi'u rhwymo'n dynn i asidau niwclëig, fel y gellir rhyddhau'r asidau niwclëig o'r sampl a'u rhyddhau i'r dyfyniad, gan hwyluso'r cam nesaf o echdynnu a phuro. Wrth ganfod asid niwclëig firaol, mae proteinase K yn un o'r cydrannau pwysig yn y toddiant samplu firysau. Gall proteinase K gracio ac anactifadu protein cot y firws, sy'n fwy diogel yn ystod y cam cludo a chanfod; yn ogystal, gall proteinase K hefyd ddiraddio RNase sy'n atal diraddio RNA firaol ac yn hwyluso canfod asid niwclëig.
Enwogrwydd proteinase K dros nos
Boed ym maes ymchwil wyddonol neu ym maes IVD, echdynnu asid niwclëig yw'r arbrawf mwyaf sylfaenol, felly mae proteinase K wedi bod yn bwysig iawn erioed. Fodd bynnag, yn y gorffennol, roedd proteinase K yn llawer llai adnabyddus na'i rôl. Rhan fawr o hyn oedd oherwydd bod y berthynas cyflenwad a galw am proteinase K yn sefydlog iawn. Ychydig o bobl fyddai'n meddwl y byddai cyflenwad proteinase K yn broblem.
Gyda dechrau epidemig y goron newydd, mae'r galw am brofion asid niwclëig wedi cynyddu'n sydyn. Erbyn diwedd mis Mehefin 2020, mae Tsieina wedi cwblhau bron i 90 miliwn o brofion coron newydd, ac mae'r nifer hwn hyd yn oed yn fwy brawychus ar raddfa fyd-eang. Mewn arbrofion echdynnu asid niwclëig, mae crynodiad gweithio proteinase K tua 50-200 μg/mL. Yn gyffredinol, mae'n cymryd tua 100 μg o broteinase K i echdynnu sampl o asid niwclëig. Mewn defnydd gwirioneddol, er mwyn cynyddu effeithlonrwydd echdynnu asid niwclëig, yn aml bydd Proteinase K yn cael ei ddefnyddio mewn symiau cynyddol. Mae canfod asid niwclëig y coronafeirws newydd wedi dod â llawer iawn o alw am proteinase K. Torrwyd y cydbwysedd cyflenwad a galw gwreiddiol o broteinase K yn gyflym, a daeth proteinase K yn ddeunydd atal epidemig pwysig dros nos.
Anawsterau wrth gynhyrchu proteinase K
Er bod pobl wedi gwerthfawrogi gwerth pwysig proteinase K gyda datblygiad yr epidemig, mae'n embaras, oherwydd y diffyg allwedd gormodol o broteinase K, nad oes llawer o gwmnïau domestig wedi bod yn ymwneud â chynhyrchu proteinase K. Pan fydd pobl eisiau sefydlu cynhyrchiad proteinase K Yn ystod y broses gynhyrchu, darganfuwyd bod proteinase K yn brotein arbennig iawn. Mae'n heriol iawn ehangu capasiti cynhyrchu proteinase K mewn cyfnod byr.
Mae cynhyrchu proteinase K ar raddfa fawr yn wynebu'r anawsterau canlynol
1. Mynegiant isel
Gall proteinase K ddiraddio'r rhan fwyaf o broteinau yn anbenodol ac achosi gwenwyndra difrifol i'r gell letyol mynegiant. Felly, mae lefel mynegiant proteinase K yn gyffredinol yn isel iawn. Mae sgrinio systemau mynegiant a straeniau sy'n mynegi proteinase K yn uchel fel arfer yn gofyn am gylchred hirach.
2. Gweddillion pigmentau ac asidau niwclëig
Mae eplesu ar raddfa fawr yn cyflwyno llawer iawn o bigment a gweddillion asid niwclëig y gwesteiwr. Mae'n anodd cael gwared ar yr amhureddau hyn gyda phroses buro syml, ac mae puro cymhleth yn cynyddu'r gost ac yn lleihau'r gyfradd adfer.
3. Ansefydlogrwydd
Nid yw proteinase K yn ddigon sefydlog, gall ensymoli ei hun, ac mae'n anodd ei storio'n sefydlog ar 37°C am amser hir heb asiant amddiffynnol.
4. Hawdd i waddodi
Wrth baratoi powdr proteinase K wedi'i rewi-sychu, er mwyn sicrhau bod cynnwys solid proteinase K yn y powdr wedi'i rewi-sychu yn fawr, mae angen ychwanegu asiant amddiffynnol wedi'i rewi-sychu mewn crynodiad uchel, ond pan fydd crynodiad proteinase K yn cyrraedd 20mg/mL ac uwch, mae'n hawdd i'r crynhoad ffurfio gwaddod, sy'n dod â anawsterau mawr i sychu proteinase K â chynnwys solid uchel.
5. Buddsoddiad mawr
Mae gan Proteinase K weithgaredd proteas cryf a gall hydrolysu proteasau eraill yn y labordy. Felly, mae proteinase K angen ardaloedd cynhyrchu arbenigol, offer a phersonél ar gyfer ymchwil a datblygu a chynhyrchu.
Toddiant proteinase K XD BIOCHEM
Mae gan XD BIOCHEM blatfform mynegiant a phuro protein aeddfed, ac mae ganddo brofiad cyfoethog o fynegiant a phuro proteinau ailgyfunol ac optimeiddio prosesau cynhyrchu. Trwy ffurfio tîm ymchwil a datblygu yn gyflym, mae'r broses gynhyrchu proteinase K ar raddfa fawr wedi'i goresgyn. Mae allbwn misol powdr sych-rewi yn fwy na 30 KG. Mae gan y cynnyrch berfformiad sefydlog, gweithgaredd penodol ensym uchel, a dim gweddillion cytochrome gwesteiwr ac asid niwclëig. Croeso i gysylltu â XD BIOCHEM Cael pecyn prawf (E-bost:sales@xdbiochem.comFfôn: +86 513 81163739).
Mae atebion technegol XD BIOCHEM yn cynnwys
Gan ddefnyddio integreiddio plasmid aml-gopïau, dewisir straeniau mynegiant uchel gyda lefel mynegiant o 8g/L, sy'n goresgyn problem lefel mynegiant isel proteinase K.
Drwy sefydlu proses buro aml-gam, llwyddwyd i gael gwared ar weddillion cytocrom y gwesteiwr a'r asid niwclëig o proteinase K islaw'r gwerth safonol.
Drwy sgrinio trwybwn uchel o fformwleiddiadau byffer amddiffynnol, dewiswyd byffer a all storio proteinase K yn sefydlog ar 37°C.
Mae byfferau sgrinio yn goresgyn y broblem bod proteinas K yn hawdd ei agregu a'i waddodi mewn crynodiadau uchel, ac yn gosod y sylfaen ar gyfer sychu-rewi cynnwys solid uchel proteinas K.
Sampl proteinase K XD BIOCHEM
Prawf sefydlogrwydd proteinase K XD BIOCHEM: ni fydd unrhyw newid sylweddol mewn gweithgaredd ar ôl 80 diwrnod ar dymheredd ystafell
Prawf sefydlogrwydd proteinase K XD BIOCHEM: ni fydd unrhyw newid sylweddol mewn gweithgaredd ar ôl 80 diwrnod ar dymheredd ystafell.
Cymhariaeth o effaith echdynnu asid niwclëig proteinase K XD BIOCHEM a chynhyrchion cystadleuol. Yn y broses o echdynnu asid niwclëig, defnyddir XD BIOCHEM a phroteinase K cystadleuol yn y drefn honno. Mae effeithlonrwydd echdynnu proteinase K XD BIOCHEM yn uwch a gwerth Ct y genyn targed yn is.
Amser postio: 31 Rhagfyr 2021