4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS: 200422-18-0

Effaith: Mae ONPG yn swbstrad a ddefnyddir yn benodol i ganfod presenoldeb a gweithgaredd yr ensym β-galactosidase. Pan fydd yr ensym β-galactosidase yn bresennol ac yn weithredol, mae'n hollti ONPG yn ddau gynnyrch: o-nitrophenol a deilliad galactos. Mae rhyddhau o-nitrophenol yn arwain at newid lliw melyn, y gellir ei fesur gan ddefnyddio sbectroffotomedr.

Cymhwysiad: Mae gan ONPG sawl cymhwysiad mewn ymchwil bioleg foleciwlaidd a biocemeg:

Pennu gweithgaredd β-galactosidase: Defnyddir ONPG yn gyffredin i fesur a meintioli gweithgaredd yr ensym β-galactosidase. Gellir mesur cyfradd ffurfio o-nitrophenol, sy'n gymesur yn uniongyrchol â gweithgaredd yr ensym, yn sbectroffotometregol.

Mynegiant a rheoleiddio genynnau: Defnyddir ONPG yn aml mewn arbrofion sy'n gysylltiedig ag astudiaethau mynegiant a rheoleiddio genynnau. Fe'i defnyddir yn aml mewn asesiadau protein ymasiad, fel y system ymasiad lacZ a ddefnyddir yn gyffredin, i astudio mynegiant genynnau o dan reolaeth hyrwyddwyr penodol. Mae'r gweithgaredd beta-galactosidase a fesurir gan ddefnyddio ONPG yn rhoi cipolwg ar lefel mynegiant genynnau.

Sgrinio am weithgaredd β-galactosidase: Gellir defnyddio ONPG fel dull sgrinio colorimetrig mewn technoleg DNA ailgyfunol i nodi presenoldeb a swyddogaeth y genyn LacZ, sy'n amgodio β-galactosidase. Mae'r dull sgrinio hwn yn helpu i nodi clonau sy'n cynnwys y genyn o ddiddordeb.

Astudiaethau cineteg ensymau: Mae ONPG hefyd yn ddefnyddiol wrth astudio cineteg yr ensym β-galactosidase. Drwy fesur cyfradd adwaith ensym-swbstrad ar wahanol grynodiadau swbstrad, mae'n bosibl pennu paramedrau cinetig fel cysonion Michaelis-Menten (Km) a chyfraddau adwaith uchaf (Vmax).