4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS: 200422-18-0

Effaith: Mae ONPG yn swbstrad a ddefnyddir yn benodol i ganfod presenoldeb a gweithgaredd yr ensym β-galactosidase.Pan fydd ensym β-galactosidase yn bresennol ac yn weithredol, mae'n hollti ONPG yn ddau gynnyrch: o-nitrophenol a deilliad galactos.Mae rhyddhau o-nitrophenol yn arwain at newid lliw melyn, y gellir ei fesur gan ddefnyddio sbectroffotomedr.

Cais: Mae gan ONPG sawl cymhwysiad mewn bioleg foleciwlaidd ac ymchwil biocemeg:

Penderfynu gweithgaredd β-galactosidase: Defnyddir ONPG yn gyffredin i fesur a meintioli gweithgaredd ensym β-galactosidase.Gellir mesur cyfradd ffurfio o-nitrophenol, sy'n uniongyrchol gymesur â gweithgaredd yr ensym, yn sbectroffotometrig.

Mynegiant a rheoleiddio genynnau: Defnyddir ONPG yn aml mewn arbrofion sy'n ymwneud ag astudiaethau mynegiant genynnau ac astudiaethau rheoleiddio.Fe'i defnyddir yn aml mewn profion protein ymasiad, megis y system ymasiad lacZ a ddefnyddir yn gyffredin, i astudio mynegiant genynnau o dan reolaeth hyrwyddwyr penodol.Mae'r gweithgaredd beta-galactosidase a fesurir gan ddefnyddio ONPG yn rhoi mewnwelediad i lefel mynegiant genynnau.

Sgrinio ar gyfer gweithgaredd β-galactosidase: Gellir defnyddio ONPG fel dull sgrinio lliwimetrig mewn technoleg DNA ailgyfunol i nodi presenoldeb ac ymarferoldeb y genyn LacZ, sy'n amgodio β-galactosidase.Mae'r dull sgrinio hwn yn helpu i adnabod clonau sy'n cynnwys y genyn o ddiddordeb.

Astudiaethau cineteg ensymau: Mae ONPG hefyd yn ddefnyddiol wrth astudio cineteg ensym β-galactosidase.Trwy fesur cyfradd adwaith ensymau-swbstrad ar wahanol grynodiadau swbstrad, mae'n bosibl pennu paramedrau cinetig megis cysonion Michaelis-Menten (Km) a chyfraddau adwaith uchaf (Vmax).