IPTG CAS: 367-93-1 Pris Gwneuthurwr
Mae Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) yn analog synthetig o lactos a ddefnyddir yn gyffredin mewn ymchwil bioleg moleciwlaidd a chymwysiadau biotechnoleg.Defnyddir IPTG yn bennaf i gymell mynegiant genynnau mewn systemau bacteriol, lle mae'n gweithredu fel sbardun moleciwlaidd i gychwyn trawsgrifio genynnau targed.
Pan gaiff ei ychwanegu at y cyfrwng twf, mae IPTG yn cael ei gymryd gan y bacteria a gall rwymo i'r protein repressor lac, gan ei atal rhag rhwystro gweithgaredd y lac operon.Mae'r lac operon yn glwstwr o enynnau sy'n ymwneud â metaboledd lactos, a phan fydd y protein repressor yn cael ei dynnu, mynegir y genynnau.
Defnyddir IPTG yn aml ar y cyd â'r hyrwyddwr mutant lacUV5, sy'n fersiwn gweithredol cyfansoddol o'r hyrwyddwr lac.Trwy gyfuno sefydlu IPTG gyda'r hyrwyddwr mutant hwn, gall ymchwilwyr gyflawni lefelau uchel o fynegiant genynnau.Mae hyn yn caniatáu ar gyfer cynhyrchu symiau mawr o brotein ar gyfer puro neu gymwysiadau eraill i lawr yr afon.
Yn ogystal â mynegiant genynnau, mae IPTG hefyd yn cael ei ddefnyddio'n aml mewn profion sgrinio glas/gwyn.Yn y dechneg hon, mae'r genyn lacZ fel arfer yn cael ei asio â genyn o ddiddordeb, a bydd bacteria sy'n mynegi'r genyn ymasiad hwn yn llwyddiannus yn cynhyrchu ensym β-galactosidase gweithredol.Pan ychwanegir IPTG ynghyd â swbstrad cromogenig fel X-gal, mae bacteria sy'n mynegi'r genyn ymasiad yn troi'n las oherwydd gweithgaredd β-galactosidase.Mae hyn yn caniatáu ar gyfer nodi a dewis straenau ailgyfunol sydd wedi integreiddio'r genyn o ddiddordeb yn llwyddiannus.
Sefydlu mynegiant genynnau: Defnyddir IPTG yn gyffredin i ysgogi mynegiant genynnau targed mewn systemau bacteriol.Mae'n dynwared y lactos inducer naturiol ac yn rhwymo i'r protein repressor lac, gan ei atal rhag rhwystro'r lac operon.Mae hyn yn caniatáu trawsgrifio a mynegiant y genynnau dymunol.
Mynegiant a phuro protein: Defnyddir anwythiad IPTG yn aml i gynhyrchu llawer iawn o broteinau ailgyfunol at wahanol ddibenion, megis astudiaethau biocemegol, cynhyrchu therapiwtig, neu ddadansoddiad strwythurol.Trwy ddefnyddio fectorau mynegiant priodol ac ymsefydlu IPTG, gall ymchwilwyr gyflawni lefelau uchel o gynhyrchu protein targed mewn gwesteiwyr bacteriol.
Sgrinio glas/gwyn: Defnyddir IPTG yn aml ar y cyd â'r genyn lacZ a swbstrad cromogenig, fel X-gal, ar gyfer profion sgrinio glas/gwyn.Mae'r genyn lacZ fel arfer yn cael ei asio i'r genyn o ddiddordeb, a bydd bacteria sy'n mynegi'r genyn ymasiad hwn yn llwyddiannus yn cynhyrchu ensym β-galactosidase gweithredol.Pan ychwanegir IPTG a'r swbstrad cromogenig, mae straenau ailgyfunol sy'n mynegi'r genyn ymasiad yn troi'n las, gan ganiatáu ar gyfer adnabod a dethol yn hawdd.
Astudiaeth o reoleiddio genynnau: Defnyddir ymsefydlu IPTG yn gyffredin mewn ymchwil i astudio rheoleiddio genynnau ac operonau, yn enwedig yr operon lac.Trwy drin crynodiadau IPTG a monitro mynegiant cydrannau lac operon, gall ymchwilwyr ymchwilio i fecanweithiau rheoleiddio genynnau a rôl ffactorau neu dreigladau amrywiol.
Systemau mynegiant genynnau: Mae IPTG yn elfen hanfodol mewn sawl system mynegiant genynnau, megis systemau sy'n seiliedig ar hyrwyddwyr T7.Yn y systemau hyn, defnyddir yr hyrwyddwr lac yn aml i yrru mynegiant T7 RNA polymerase, sydd, yn ei dro, yn trawsgrifio genynnau targed o dan reolaeth dilyniannau hyrwyddwr T7.Defnyddir IPTG i gymell mynegiant T7 RNA polymeras, gan arwain at actifadu mynegiant genynnau targed.
| Cyfansoddiad | C9H18O5S |
| Assay | 99% |
| Ymddangosiad | Powdr gwyn |
| Rhif CAS. | 367-93-1 |
| Pacio | Bach a swmpus |
| Oes Silff | 2 flynedd |
| Storio | Storio mewn ardal oer a sych |
| Ardystiad | ISO. |
